Objetivo: Presentar los resultados del trasplante de células epiteliales conjuntivales autólogas cultivadas ex vivo (EVCAU) en pacientes con insuficiencia limbar total (LSCD).

Métodos: EVCAU fueron cultivadas sobre membrana amniótica (MA) denudada y trasplantadas en 12 ojos de 10 pacientes con LSCD total. Se evaluaron parámetros clínicos biomicroscópicos de insuficiencia limbar (pérdida de transparencia epitelial, neovascularización superficial, irregularidad epitelial y áreas de ruptura epitelial), agudeza visual, citología de impresión, estudios inmunohistoquímicos (CK3/CK19) y estudios con microscopía confocal. Los estudios inmunohistoquímicos e histológicos se realizaron sobre tres botones corneales en pacientes en los que fue practicada queratoplastia penetrante tras EVCAU.

Resultados: El epitelio conjuntival cultivado formó 4-5 capas celulares y una estructura similar a una membrana basal. Los estudios inmunohistoquímicos demostraron positividad de CK3, CK19, MUC5AC,Ki-67, P63 y ABCG2. Se observó mejoría en parámetros clínicos en 10/12 casos (83%) con un tiempo de seguimiento medio de 18.5 meses (rango, 15-26), y estos ojos mostraron mejoría en la citología de impresión, inmunohistoquímica y microscopía confocal. El estudio de los botones corneales mostró un epitelio bien estructurado con 5-6 capas y positividad para CK3, CK19, P63, conexina 43 y también MUC5AC.

Conclusiones: Los autores muestran los resultados preliminares de EVCAU en la reconstrucción de la superficie ocular en pacientes con LSCD total. Sugieren que son necesarios estudios adicionales para determinar la eficacia a largo plazo del procedimiento.

La restauración de un fenotipo corneal es el objetivo de los procedimientos reconstructivos de la superficie ocular en pacientes con LSCD. Clásicamente se ha practicado en estos casos un trasplante limbar en alguna de sus variantes. Por otra parte, se han publicado estudios que incluyen la expansión ex vivo de células epiteliales corneales cultivadas, bien de procedencia autóloga o heteróloga (1,2), si bien en este último caso sería necesario el empleo de fármacos inmunosupresores. Más recientemente, se ha publicado también el empleo de células epiteliales autólogas de mucosa oral cultivadas ex vivo para tratar la LSCD total (3). Los autores de este trabajo emplean una tercera fuente de células epiteliales, el epitelio conjuntival, que es cultivado ex vivo y posteriormente trasplantado en pacientes con LSCD. En estudios previos, el trasplante de células epiteliales conjuntivales cultivadas ha mostrado buenos resultados, con un aspecto similar al epitelio corneal, transparente, liso y uniforme.

La técnica consistió en la obtención de una biopsia conjuntival del fornix superior que se colocó sobre MA denudada y posteriormente en medio de cultivo. Una vez comprobado el crecimiento celular, se realizó una peritomía de 360º en el ojo receptor, resección del pannus fibrovascular e implante de la MA con las células epiteliales conjuntivales. Se realizó citología de impresión en los 4 cuadrantes previa y a los 12 meses. El fenotipo epitelial fue evaluado mediante análisis inmunohistoquímico (CK3 y CK19). También se realizó microscopía confocal con el HRT-II con módulo de Rostock. Los pacientes fueron evaluados clínicamente considerando éxito cuando existía una mejoría en la transparencia epitelial, neovascularización y regularidad del epitelio. En ojos con opacidad estromal tras la EVCAU se realizó una queratoplastia penetrante, analizándose los botones corneales extraídos.

Los resultados obtenidos fueron considerados satisfactorios obteniendo un epitelio transparente y regular sin neovascularización en 8 casos (66.6%), éxito parcial en dos casos (16%) en los que se produjo neovascularización en dos cuadrantes y malos resultados con complicaciones en dos pacientes (16%) con diagnósticos previos de ojo seco severo y síndrome de Stevens-Johnson, que desarrollaron un defecto epitelial persistente y una queratitis infecciosa.

La técnica fue valorada positivamente por los autores. Con un seguimiento medio de 18.5 meses, se consiguió una superficie ocular lisa y transparente, sin neovascularización corneal en la mayoría de los casos. El estudio citológico demostró un epitelio de características corneales en el 16% de los casos, y una mezcla de células epiteliales corneales y conjuntivales en el 66%, que también fue puesto de manifiesto en el examen histopatológico de los botones corneales, todo ello empleando una fuente de células epiteliales autóloga y habitualmente accesible en la mayoría de los casos. Concluyen recomendando la realización de nuevos estudios para evaluar la eficacia a largo plazo del procedimiento.

AUTOR:
DAVID DIAZ VALLE.
Hospital Clínico San Carlos. Madrid.

1. Pellegrini G, Traverso CE, Franzi AT, et al. Long-term restoration of damaged corneal surfaces with autologous cultivated corneal epithelium. Lancet. 1997;349:990–993.

2. Daya SM, Watson A, Sharpe JR, et al. Outcomes and DNA analysis of ex vivo expanded stem cell allograft for ocular surface reconstruction. Ophthalmology. 2005;112:470–477.

3. Nishida K, Yamato M, Hayashida Y, et al. Corneal reconstruction with tissue-engineered cell sheets composed of autologous oral mucosal epithelium. N Engl J Med. 2004;351:1187–1196.